Пиросеквенирование - это новая стратегия секвенирования ДНК использующая каскад ферментативных реакций, приводящий к появлению светового сигнала при включении каждого следующего нуклеотида в одноцепочечную ДНК-матрицу. Технология пиросеквенирования использует простые химические реакции и надежную систему детекции, исключающую необходимость применения гелей, радиоактивномеченных нуклеотидов и других специфических меток.

Технология Pyrosequencing позволяет проводить любые виды генетического анализа в режиме реального времени: от рутинного секвенирования ДНК до генотипирования и анализа мутаций.

Этап 1

Сиквенсные праймеры гибридизуются с одноцепочечной ДНК матрицей и инкубируются с ферментами - ДНК-полимеразой, АТР-сульфурилазой, люциферазой и апиразой, и субстратами - 5'-фосфосульфатом (APS) и люциферином.

Этап 2

Первый из четырех дезоксинуклеотидтрифосфатов (dNTP) вводится в реакцию. ДНК-полимераза катализирует включение dNTP в цепь ДНК. Присоединение каждого следующего dNTP сопровождается выбросом пирофосфата (PPi) в количестве, эквимолярном количеству включенных нуклеотидов.

Этап 3

АТР-сульфурилаза количественно переводит пирофосфат (PPi) в трифосфат (ATP) в присутствии аденозин 5'-фосфосульфата (APS). Под действием АТР люцифераза переводит люциферин в оксилюциферин. Эта реакция сопровождается выделением видимого света, количество которого пропорционально количеству АТР. Этот свет детектируется CCD-камерой, и отражается в виде пика на пирограмме. Высота каждого пика (светового сигнала) пропорциональна количеству включенных нуклеотидов.

Этап 4

Апираза постоянно расщепляет невключившиеся трифосфаты и избыток АТР. По окончании деградации в реакцию вводится следующий трифосфат.

Вместо дезоксиаденозинтрифосфата (dATP) в реакции используют дезоксиаденозин a-тиотрифосфат (dATPaS), так как первый узнается ДНК- полимеразой, но не узнается люциферазой.

Новости, события

15-18 сентября 2011 года
VI Всемирный конгресс по иммунопатологии и респираторной аллергии, VIII съезд аллергологов и иммунологов СНГ (Москва, ЦМТ на Красной Пресне)


5-8 июля 2011 года
XI Международный конгресс «Современные проблемы иммунологии, аллергологии и иммуноформакологии» (Москва, мэрия, РААКИ)


27-30 июня 2011 года
4-й Международный конгресс молекулярной медицины (EAACI, Турция, Стамбул)


16-18 июня 2011 года
XII специализированная выставка медицинского оборудования и технологий для современной медицины и здравоохранения (Зимний театр, Сочи)


23-26 мая 2011 года
Дни иммунологии в Санкт-Петербурге (Санкт-Петербург, г-ца «Москва», РААКИ СПб)


21 апреля 2011 года
Московская региональная конференция «Детская аллергология: от науки к практике» (Дом учёных)


13 апреля 2011 года
Конференция аллергологов Нижнего Новгорода и Поволжья (совместно с клиникой «Ника-Спринг»)


7 апреля 2011 года
Конференция для специалистов Научного Центра здоровья детей (Москва)


Апрель 2011 года
В МЗиСР РФ зарегистрирован первый в мире иммунный аллергочип ISAC (Phadia), технология microarray на 103 аллергена (аллергокомпонента)


12-17 февраля 2011 года
– XV конгресс педиатров России с международным участием «Актуальные проблемы педиатрии», школа детского аллерголога-иммунолога (НЦЗД, Москва)


30 января – 5 февраля 2011 года
II Всероссийская школа по клинической иммунологии «ИММУНОЛОГИЯ ДЛЯ ВРАЧЕЙ» (Пушкинские Горы, Псковская область)